【中正鉴定】实验所需设备介绍二一ABI3130xl测序仪

宁夏亲子鉴定实验室设备：毛细管电泳的原理

扩增完成后的反应管里，几十个 STR 基因座的片段混在一起，怎么把"孩子的等位基因各来自谁"读出来？答案是电泳分离加荧光检测，承担这一步的设备是 ABI3130xl 基因分析仪。本篇把分离原理讲透，宁夏的委托人看完即可理解报告图谱的来龙去脉；样本办理事宜拨 4008-808-727。

电泳为什么能按长度分离

DNA 骨架上的磷酸基团让分子整体带负电，在电场里向正极迁移；迁移通道是一根内径极细的毛细管，管内充满分离胶，胶的网状结构对片段产生阻力——片段越短受到的阻力越小、跑得越快，越长则越慢。一组长度只差两个碱基的片段，到头的时间差足以被分辨，这就是 STR 分型的分辨率来源：孩子的两个等位基因往往只差几个重复单元，靠它分开。电泳电压最高 20 千伏，电压越高迁移越快，但发热也随之增加，设备的操作温度范围设计在 18℃~65℃ 来兜住稳定性。

荧光信号怎么变成基因座

不同基因座的引物带上不同颜色的荧光染料，氩离子多波长激光（主要激发波长 488 与 514.5 纳米）扫过检测窗口，片段被激发发光，检测光路实时记录每个峰的全波长光谱。同一个泳道里，长度相近的不同基因座片段因为颜色不同也能区分——多色荧光互不串扰，一次进样可以同时读多个基因座。收集到的光谱数据交由 GeneMapper 软件自动判读，与等位基因分型标准物比对后给出每个基因座的分型。

毛细管与进样体系

系统提供预组装的 4 根或 16 根内壁无涂层毛细管，长度有多种规格适配不同应用；毛细管在 3130xl 系统上的特定使用寿命为 100 次进样，到期整束更换。样品从 96 孔板自动进样（兼容 384 孔板），测序和片段分析用同一种分离胶，甚至在同一样品板上可同时进行——对亲子鉴定而言，一批 96 个反应管的分型在连续运行中完成，孔位与样本编号一一对应。

数据质量的两道关

其一，设备层：毛细管外径、内径与间距经过优化把折射造成的信号损失降到低，检测光路实时读低本底全波长数据；其二，耗材层：分离胶、毛细管按寿命与批号管理，到期更换留痕。两道关保证的不是某一张图谱好看，而是批内所有样本的判读标准一致。

等位基因判读的参照系

分型软件判读等位基因不是看峰"像什么"，而是与等位基因分型标准物（Allelic Ladder）比对：标准物含该基因座全部常见等位基因，每次电泳随行或定期运行，各样本峰的片段长度与标准物梯带对齐后，才能命名等位基因——这一步把"跑得准"转成"叫得准"。峰形异常（ stutter 峰偏高、拉扯峰、脱座）有固定排查路径：先看对照与标准物是否正常，再查该样本扩增产物质量，最后才怀疑设备状态；排查结论记入运行日志。报告上的每一个分型，背后都有这层参照与复核。

收束

收束

理解了"长度分长短、荧光分基因座"这八个字，报告上的峰图就不再抽象。样本送检、报告解读与网点交样，银川市金凤区受理网点与宁夏各市县采样网点均可办理，咨询电话 4008-808-727。